Скажи клещам НЕТ!
Готовь сани летом, а телегу зимой - гласит народная мудрость. По долгу службы пару раз приходилось консультировать людей по созданию биобарьеров (в частности против комаров). И вот подумал я, что для всех владельцев дач/загородных домов гораздо более опасным явлением является клещ. Тот самый, который внутри переносить боррелиоз (болезнь Лайма). Уверен, многие отмахнутся, дескать мы уже все обработали и закупились акарицидными средствами (чаще всего на основе одного и того же компонента - перметрина). Но клещи реагируют на изменение ситуации гораздо оперативнее людей и приобретают иммунитет. Так что "надежды юношей питают", не уверен, что к клещам применимо понятие плацебо :)
Когда в очередной раз на даче пришлось извлекать из жены, брата и тещи порцию клещей, я наконец-то задумался, что пора бы создать какой-то заслон от этих гостей из леса…
Так что же делать? А вот брать и планировать на дачах биобарьеры (или точнее фитобарьеры). Это обычные посевы растений, обладающих отпугивающим эффектом против Ixodes ricinus (собачий клещ), Ixodes persulcatus (таежный клещ) — распространенных в Европе видов клещей, переносящих возбудителей бореллиоза. Весной дал задание жене посадить вдоль забора рядок растений - и весь летне-осенний сезон спи спокойно, не опасаясь что из ближайшего леса приползет клещ (или собака на себе принесет).
Что же нужно сажать и сеять ?
Чаще всего подходящими акарицидными и реппелентными свойствами обладают растения семейств Астровые, Яснотковые, Пасленовые, Вербеновые.
Из официально признанных индивидуальных растительных репеллентов следует упомянуть соединение 2-ундеканон (он же метилнонилкетон). Соединение это присутствует в таких растениях как дикорастущий томат, садовая клубника, или декоративная хауттюйния сердецвидная. В качестве перспективного репеллента против клещей рассматривается соединение нооткатон, которое содержится в эфирных маслах грейпфрута и иногда встречающегося на приусадебных участках кипариса нутканского.
Что касается растительных генераторов репеллентов, которые можно вырастить на приусадебном участке, то наиболее выраженным эффектом по отпугиванию клещей обладают эфирные масла лимонной травы и ландыша. Притом их репеллентная активность сравнима с эталонным химическим репеллентом N,N-диэтил-м-толуамидом. Основным клещегонным компонентом в эфирных маслах этих растений являются цитронеллол, гераниол и эвгенол, фенетиловый спирт.
Высокой активностью против черноногого клеща обладают эфирные масла такого распространенного декоративного растения как котовник, или кошачья мята. Похожая внешне на котовник, лаванда, обладает превосходной отпугивающей и акарицидной активностью по отношению к собачьему клещу. Поэтому например я искренне завидую тем, кто свою дачу превратил в лавандовый рай. Клеща там точно никогда не увидишь
Ну и если не привязываться к царству растений, можно упомянуть единственный одобренный EPA гриб-биоинсектицид - Metarhizium brunneum (или Metarhizium anisopliae). Грибок этот встречается в почвах по всему миру, а также доступен в виде лиофилизированной биомассы. Но наши "лесники" по старинке обочины травят непонятно чем, скорее всего толуамидом или перметрином. Поэтому видимо такая и статистика. Надеюсь информация будет полезна и, главное, подтолкнет хотя бы кого-то к активным действиям. Все-таки зимние месяцы — это оптимальное время для планирования того, что будет расти на приусадебном участке. Если недалеко лес — не экономьте на себе, выделите небольшой участок под биобарьер, не стоит надеяться что “если вдруг клещ - доксициклин поможет”.
#plant, #pest-repelling, #biosafety #ixodidae, #ticks, #lyme disease, #biocontrol, #acarology
Готовь сани летом, а телегу зимой - гласит народная мудрость. По долгу службы пару раз приходилось консультировать людей по созданию биобарьеров (в частности против комаров). И вот подумал я, что для всех владельцев дач/загородных домов гораздо более опасным явлением является клещ. Тот самый, который внутри переносить боррелиоз (болезнь Лайма). Уверен, многие отмахнутся, дескать мы уже все обработали и закупились акарицидными средствами (чаще всего на основе одного и того же компонента - перметрина). Но клещи реагируют на изменение ситуации гораздо оперативнее людей и приобретают иммунитет. Так что "надежды юношей питают", не уверен, что к клещам применимо понятие плацебо :)
Когда в очередной раз на даче пришлось извлекать из жены, брата и тещи порцию клещей, я наконец-то задумался, что пора бы создать какой-то заслон от этих гостей из леса…
Так что же делать? А вот брать и планировать на дачах биобарьеры (или точнее фитобарьеры). Это обычные посевы растений, обладающих отпугивающим эффектом против Ixodes ricinus (собачий клещ), Ixodes persulcatus (таежный клещ) — распространенных в Европе видов клещей, переносящих возбудителей бореллиоза. Весной дал задание жене посадить вдоль забора рядок растений - и весь летне-осенний сезон спи спокойно, не опасаясь что из ближайшего леса приползет клещ (или собака на себе принесет).
Что же нужно сажать и сеять ?
Чаще всего подходящими акарицидными и реппелентными свойствами обладают растения семейств Астровые, Яснотковые, Пасленовые, Вербеновые.
Из официально признанных индивидуальных растительных репеллентов следует упомянуть соединение 2-ундеканон (он же метилнонилкетон). Соединение это присутствует в таких растениях как дикорастущий томат, садовая клубника, или декоративная хауттюйния сердецвидная. В качестве перспективного репеллента против клещей рассматривается соединение нооткатон, которое содержится в эфирных маслах грейпфрута и иногда встречающегося на приусадебных участках кипариса нутканского.
Что касается растительных генераторов репеллентов, которые можно вырастить на приусадебном участке, то наиболее выраженным эффектом по отпугиванию клещей обладают эфирные масла лимонной травы и ландыша. Притом их репеллентная активность сравнима с эталонным химическим репеллентом N,N-диэтил-м-толуамидом. Основным клещегонным компонентом в эфирных маслах этих растений являются цитронеллол, гераниол и эвгенол, фенетиловый спирт.
Высокой активностью против черноногого клеща обладают эфирные масла такого распространенного декоративного растения как котовник, или кошачья мята. Похожая внешне на котовник, лаванда, обладает превосходной отпугивающей и акарицидной активностью по отношению к собачьему клещу. Поэтому например я искренне завидую тем, кто свою дачу превратил в лавандовый рай. Клеща там точно никогда не увидишь
Ну и если не привязываться к царству растений, можно упомянуть единственный одобренный EPA гриб-биоинсектицид - Metarhizium brunneum (или Metarhizium anisopliae). Грибок этот встречается в почвах по всему миру, а также доступен в виде лиофилизированной биомассы. Но наши "лесники" по старинке обочины травят непонятно чем, скорее всего толуамидом или перметрином. Поэтому видимо такая и статистика. Надеюсь информация будет полезна и, главное, подтолкнет хотя бы кого-то к активным действиям. Все-таки зимние месяцы — это оптимальное время для планирования того, что будет расти на приусадебном участке. Если недалеко лес — не экономьте на себе, выделите небольшой участок под биобарьер, не стоит надеяться что “если вдруг клещ - доксициклин поможет”.
#plant, #pest-repelling, #biosafety #ixodidae, #ticks, #lyme disease, #biocontrol, #acarology
January 19, 2020
Ищем боррелию в клеще своими силами.
Поступил мне от читателя вопрос, ради которого я даже прервал написание очередной растительной заметки. Касался он механизма идентификации боррелий в самом клеще. Почему-то процедура эта в наших краях усложнена до невозможности. Ну а я вспомнил, что в описании канала есть словосочетание "DIYbio", а значит самодеятельная микроскопия под целевую тематику тоже подходит. Сегодня предлагаю вспомнить школьные уроки биологии и прочитать про то, как в домашних условиях, при наличии доступной техники (все оборудование без проблем находится на avito, kufar, olx и т.п.) проверить есть ли внутри пойманного на участке (или на себе) клеща потенциальные переносчики болезни Лайма - боррелии.
Использование метода микроскопии наиболее целесообразно при оценке зараженности клещей-переносчиков. Объектом изучения служит кишечник живых голодных особей, в котором боррелии обнаруживаются особенно часто.
Необходимое оборудование: микроскоп с темнопольным конденсором ОИ-13 и препаратоводителем типа СТ-12, осветитель ОИ-19 или другой системы, чистые обезжиренные предметные стекла толщиной не более 1,2 мм, покровные стекла 18 x 18 мм, заточенные препарировальные иглы. Оптимальна сухая система с общим увеличением x600 (объектив - x40; бинокулярная насадка АУ-12 - x1,5; окуляры - x10).
Для приготовления препарата из взрослого клеща на предметное стекло наносят каплю физиологического раствора (0,9%-ный раствор поваренной соли в дистиллированной воде) объемом 20 мкл, в которую помещают исследуемую особь. Придерживая клеща одной препарировальной иглой, второй надо сделать 5 - 6 надрезов брюшка и слегка надавить на него так, чтобы в физиологический раствор вытекло небольшое количество бурого по цвету материала. Этот материал, состоящий преимущественно из обрывков эпителия средней кишки и элементов ее содержимого, круговым перемещением остатков исследуемого клеща равномерно распределяют по площади 0,7 - 0,8 кв. см. Затем каплю перекрывают покровным стеклом. Такой препарат начинает подсыхать через 10 - 15 мин., поэтому его просмотр следует начинать немедленно после приготовления. При необходимости некоторое время он может быть сохранен во влажной камере (или же просто закрытая чашка Петри с увлажнённым фильтром на дне). Для просмотра препарата освещение устанавливают так, чтобы при закрытой диафрагме осветителя на наложенном на зеркало микроскопа листе бумаги можно было четко видеть изображение нити спирали лампы, что достигается передвижением патрона с ней в кожухе осветителя. После установки света открывают диафрагму осветителя, на верхнюю линзу конденсора наносят капли дистиллированной воды и помещают препарат на предметный столик микроскопа. Далее, используя объектив с небольшим увеличением (x8 - x9), поднимая и опуская конденсор, следует добиться появления в поле зрения светлого пятна, которое с помощью зеркала и регулировочных винтов конденсора выводят на середину поля. Установив объектив x40, переходят к просмотру. Поля зрения просматривают параллельными рядами так, чтобы вся площадь препарата могла быть обследована равномерно. Для этого делают соответствующие интервалы между полями зрения в одном ряду, а также между соседними рядами. В препаратах из сильно инфицированных клещей боррелий обычно удается обнаружить в самом начале просмотра. Но т.к. среди зараженных переносчиков, как правило, преобладают слабо инфицированные особи, то выявление спирохет часто требует большего объема работы. Норма просмотра, при которой препарат может считаться отрицательным, составляет не менее 200 - 250 полей зрения. Аналогичным образом можно вести и исследование нимф. При этом объем капли физиологического раствора, в которой иссекают клеща, должен быть значительно меньше (не более 5 мкл).
#DIYbio, #biosafety #ixodidae, #ticks, #lyme_disease, #biocontrol, #acarology, #microscopy
Поступил мне от читателя вопрос, ради которого я даже прервал написание очередной растительной заметки. Касался он механизма идентификации боррелий в самом клеще. Почему-то процедура эта в наших краях усложнена до невозможности. Ну а я вспомнил, что в описании канала есть словосочетание "DIYbio", а значит самодеятельная микроскопия под целевую тематику тоже подходит. Сегодня предлагаю вспомнить школьные уроки биологии и прочитать про то, как в домашних условиях, при наличии доступной техники (все оборудование без проблем находится на avito, kufar, olx и т.п.) проверить есть ли внутри пойманного на участке (или на себе) клеща потенциальные переносчики болезни Лайма - боррелии.
Использование метода микроскопии наиболее целесообразно при оценке зараженности клещей-переносчиков. Объектом изучения служит кишечник живых голодных особей, в котором боррелии обнаруживаются особенно часто.
Необходимое оборудование: микроскоп с темнопольным конденсором ОИ-13 и препаратоводителем типа СТ-12, осветитель ОИ-19 или другой системы, чистые обезжиренные предметные стекла толщиной не более 1,2 мм, покровные стекла 18 x 18 мм, заточенные препарировальные иглы. Оптимальна сухая система с общим увеличением x600 (объектив - x40; бинокулярная насадка АУ-12 - x1,5; окуляры - x10).
Для приготовления препарата из взрослого клеща на предметное стекло наносят каплю физиологического раствора (0,9%-ный раствор поваренной соли в дистиллированной воде) объемом 20 мкл, в которую помещают исследуемую особь. Придерживая клеща одной препарировальной иглой, второй надо сделать 5 - 6 надрезов брюшка и слегка надавить на него так, чтобы в физиологический раствор вытекло небольшое количество бурого по цвету материала. Этот материал, состоящий преимущественно из обрывков эпителия средней кишки и элементов ее содержимого, круговым перемещением остатков исследуемого клеща равномерно распределяют по площади 0,7 - 0,8 кв. см. Затем каплю перекрывают покровным стеклом. Такой препарат начинает подсыхать через 10 - 15 мин., поэтому его просмотр следует начинать немедленно после приготовления. При необходимости некоторое время он может быть сохранен во влажной камере (или же просто закрытая чашка Петри с увлажнённым фильтром на дне). Для просмотра препарата освещение устанавливают так, чтобы при закрытой диафрагме осветителя на наложенном на зеркало микроскопа листе бумаги можно было четко видеть изображение нити спирали лампы, что достигается передвижением патрона с ней в кожухе осветителя. После установки света открывают диафрагму осветителя, на верхнюю линзу конденсора наносят капли дистиллированной воды и помещают препарат на предметный столик микроскопа. Далее, используя объектив с небольшим увеличением (x8 - x9), поднимая и опуская конденсор, следует добиться появления в поле зрения светлого пятна, которое с помощью зеркала и регулировочных винтов конденсора выводят на середину поля. Установив объектив x40, переходят к просмотру. Поля зрения просматривают параллельными рядами так, чтобы вся площадь препарата могла быть обследована равномерно. Для этого делают соответствующие интервалы между полями зрения в одном ряду, а также между соседними рядами. В препаратах из сильно инфицированных клещей боррелий обычно удается обнаружить в самом начале просмотра. Но т.к. среди зараженных переносчиков, как правило, преобладают слабо инфицированные особи, то выявление спирохет часто требует большего объема работы. Норма просмотра, при которой препарат может считаться отрицательным, составляет не менее 200 - 250 полей зрения. Аналогичным образом можно вести и исследование нимф. При этом объем капли физиологического раствора, в которой иссекают клеща, должен быть значительно меньше (не более 5 мкл).
#DIYbio, #biosafety #ixodidae, #ticks, #lyme_disease, #biocontrol, #acarology, #microscopy
January 23, 2020
Продолжение...
Продолжение рассказа про микроскопию клещей. Пару слов о приготовлении и просмотре окрашенных фиксированных препаратов из клещей.
Необходимое оборудование: микроскоп со светлопольным конденсором и препаратоводителем, осветитель ОИ-19 или другой системы, предметные стекла толщиной не более 1,4 - 1,5 мм, острые ножницы, глазной пинцет. Оптимальное увеличение - x600 - x750 в системе с масляной иммерсией (объективы: x90 - x100).
Для приготовления препарата из взрослого клеща, удерживая его пинцетом, отрезают задний край тела исследуемой особи. Срез промакивают фильтровальной бумагой. Держа клеща вертикально, проводят срезом по поверхности предметного стекла, делая мазки по 2,5 - 3,0 см. Мазки высушивают на воздухе и фиксируют. Наиболее простой способ - фиксация в пламени спиртовки или газовой горелки. Для этого предметное стекло (мазками вверх) трижды проводят над пламенем так, чтобы его прямое воздействие не превышало 1 - 2 сек. После этого препарат можно длительное время хранить в сухом месте при комнатной температуре. Окраску проводят общепринятым способом по Романовскому - Гимза (40 - 60 мин. в 5% водном растворе Гимза с последующим ополаскиванием и высушиванием).
Затем препарат необходимо докрасить кристаллическим фиолетовым в течение 10 - 30 мин., после этого слегка ополоснуть под тонкой струйкой воды, быстро удалить оставшиеся капли спринцовкой (фильтровальную бумагу использовать для этого не рекомендуется) и высушить. Состав краски:
Краситель растворяют в спирте и смешивают с раствором оксалата. Полученную краску можно хранить при комнатной температуре не менее года и использовать многократно. Т.к. выцветание препарата начинается достаточно быстро, его просмотр должен быть проведен не позже чем через 2 - 3 недели после приготовления. До этого препараты нужно хранить в темноте. В случае выцветания препарата возможна его повторная докраска кристаллическим фиолетовым указанным выше способом.
При просмотре препарата поиск боррелий ведут на тонких (не более одного слоя клеток) участках мазка с таким расчетом, чтобы в каждом из двух мазков просмотреть не менее 100 - 150 полей зрения. Выполнение этого объема работы с высокой степенью вероятности гарантирует обнаружение боррелий в препарате из инфицированного клеща.
Для приготовления препарата из нимфы ее раздавливают любым тонким инструментом с зашлифованным концом и остатками клеща проводят по предметному стеклу. Обычно таким путем удается сделать лишь один мазок, который обрабатывают и исследуют как описано выше.
#DIYbio, #biosafety #ixodidae, #ticks, #lyme_disease, #biocontrol, #acarology, #microscopy
Продолжение рассказа про микроскопию клещей. Пару слов о приготовлении и просмотре окрашенных фиксированных препаратов из клещей.
Необходимое оборудование: микроскоп со светлопольным конденсором и препаратоводителем, осветитель ОИ-19 или другой системы, предметные стекла толщиной не более 1,4 - 1,5 мм, острые ножницы, глазной пинцет. Оптимальное увеличение - x600 - x750 в системе с масляной иммерсией (объективы: x90 - x100).
Для приготовления препарата из взрослого клеща, удерживая его пинцетом, отрезают задний край тела исследуемой особи. Срез промакивают фильтровальной бумагой. Держа клеща вертикально, проводят срезом по поверхности предметного стекла, делая мазки по 2,5 - 3,0 см. Мазки высушивают на воздухе и фиксируют. Наиболее простой способ - фиксация в пламени спиртовки или газовой горелки. Для этого предметное стекло (мазками вверх) трижды проводят над пламенем так, чтобы его прямое воздействие не превышало 1 - 2 сек. После этого препарат можно длительное время хранить в сухом месте при комнатной температуре. Окраску проводят общепринятым способом по Романовскому - Гимза (40 - 60 мин. в 5% водном растворе Гимза с последующим ополаскиванием и высушиванием).
Красящую смесь Романовского-Гимзы, которая имеет в основе краску Романовского-Райта, в виде порошка (коммерческий краситель) растворяют в смеси равных объёмов метилового спирта и глицерина (800 мг красителя на 100 мл растворителя). Краситель растворяется плохо, поэтому лучше его растереть с растворителем в количестве 300 мг на 100 мл, а затем, помешивая, добавлять краситель до получения нужной концентрации. Приготовление красителя часто занимает несколько дней. Важно в качестве растворителей использовать химически чистый метиловый спирт и глицерин, так как примеси ухудшают свойства красителя. Вместо метилового спирта можно применять 100 % этиловый спирт. Приготовленную красящую смесь хранят в сухом прохладном месте в плотно закрытом сосуде. Затем препарат необходимо докрасить кристаллическим фиолетовым в течение 10 - 30 мин., после этого слегка ополоснуть под тонкой струйкой воды, быстро удалить оставшиеся капли спринцовкой (фильтровальную бумагу использовать для этого не рекомендуется) и высушить. Состав краски:
80 мл 2% раствора оксалата аммония (калия или натрия)20 мл метилового или этилового спирта 2 г красителя кристаллического фиолетового Краситель растворяют в спирте и смешивают с раствором оксалата. Полученную краску можно хранить при комнатной температуре не менее года и использовать многократно. Т.к. выцветание препарата начинается достаточно быстро, его просмотр должен быть проведен не позже чем через 2 - 3 недели после приготовления. До этого препараты нужно хранить в темноте. В случае выцветания препарата возможна его повторная докраска кристаллическим фиолетовым указанным выше способом.
При просмотре препарата поиск боррелий ведут на тонких (не более одного слоя клеток) участках мазка с таким расчетом, чтобы в каждом из двух мазков просмотреть не менее 100 - 150 полей зрения. Выполнение этого объема работы с высокой степенью вероятности гарантирует обнаружение боррелий в препарате из инфицированного клеща.
Для приготовления препарата из нимфы ее раздавливают любым тонким инструментом с зашлифованным концом и остатками клеща проводят по предметному стеклу. Обычно таким путем удается сделать лишь один мазок, который обрабатывают и исследуют как описано выше.
#DIYbio, #biosafety #ixodidae, #ticks, #lyme_disease, #biocontrol, #acarology, #microscopy
January 23, 2020